Sådan gør du serielle fortynninger

I kemi er fortynding en proces, der reducerer koncentrationen af et stof i en opløsning. Når det er gjort i serie, er det en gentagen fortynding af en opløsning, der hurtigt forstærker fortyndingsfaktoren. Det udføres generelt i eksperimenter, som kræver meget fortyndede opløsninger med stor præcision, såsom dem, der involverer koncentrationskurver i en logaritmisk skala eller for at bestemme bakteriedensiteten. Derudover er det almindeligt anvendt i eksperimentelle videnskaber som biokemi, mikrobiologi, farmakologi og fysik.

indhold

Trin

Metode 1udførelse af en grundlæggende fortynding
Metode 2beregningsfaktor og slutfortyndingskoncentration

Kilder og citater

trin

Metode 1
Udførelse af en grundlæggende fortynding

Bestem den ideelle væske til fortynding. Væsken, hvori stoffet vil blive fortyndet, er meget vigtigt. Mange opløsninger vil blive fortyndet i destilleret vand, men det vil ikke altid være tilfældet. Hvis fortyndingen er fra bakterier eller andre celler, vil de sandsynligvis blive fortyndet i et dyrkningsmedium. Den valgte væske vil blive anvendt til hver seriefortynding.

Hvis du ikke er sikker på, hvilken væske du skal bruge, spørg efter hjælp eller søg online for at se om andre mennesker allerede har gjort en lignende fortynding.

Billede med titlen Serial Dilutions Trin 2

Forbered flere reagensglas med 9 ml fortyndingsvæske. Disse rør bliver de rene prøver til fortynding. Den ufortyndede prøve tilsættes til det første rør og derefter serielt fortyndet i de følgende rør.

En nyttig teknik er at mærke alle rør før start, så der er ingen forvirring efter at have få fortyndingerne.
Hvert rør indeholder en tyndfoldet fortynding af det ufortyndede rør. Det første rør vil være en fortynding af "1:10", den anden af "1: 100", den tredje en "1: 1000" blanding og så videre. Bestem dog i forvejen antallet af fortyndinger, der er nødvendige for at undgå at spilde rør eller fortyndingsvæske.

Billedbetegnelse Gør seriefortyndinger Trin 3

Forbered et reagensglas med mindst 2 ml ufortyndet opløsning. Den mindste mængde, der kræves for at udføre denne seriefortynding, er 1 ml ufortyndet opløsning. Men hvis der kun er 1 ml, er der intet tilbage af opløsningen. Mærk dette rør med "SND" for "ufortyndet opløsning".

Bland godt, før du begynder fortynding.

Billedbetegnelse Do Serial Dilutions Trin 4

Lav den første fortynding. Brug en pipette til at overføre 1 ml ufortyndet opløsning fra "SND" -røret i det "1:10" -mærkede testrør indeholdende 9 ml fortyndingsvæske og bland grundigt. Der er nu 1 ml ufortyndet opløsning i 9 ml fortyndingsvæske. Derfor blev opløsningen fortyndet med en faktor på ti.

Billedbetegnelse Gør seriefortyndinger Trin 5

Lav den anden fortynding. I denne del af den serielle fortynding passeres 1 ml af "1:10" røropløsningen i "1: 100" -røret, som har 9 ml fortyndingsvæske. Bland grundigt "1:10" -røret grundigt, før væsken passerer til næste rør. Derefter blandes røret "1: 100" efter fortynding. Således blev opløsningen i "1:10" testrøret fortyndet ti gange i "1: 100" -røret.

Billedbetegnelse Gør seriefortyndinger Trin 6

Udvid proceduren til at udføre større seriefortyndinger. Denne proces kan gentages så mange gange som nødvendigt, indtil den ønskede løsning er nået. I et eksperiment, der involverer koncentrationskurver, er det muligt at anvende en seriefortynding til at oprette en række opløsninger med fortyndinger på 1, "1:10", "1: 100" og "1: 1000".

Metode 2
Beregningsfaktor og slutfortyndingskoncentration

Billede med titlen Serial Dilutions Trin 7

Beregn andelen af den endelige fortynding af den serielle fortynding. Det totale fortyndingsforhold kan bestemmes ved at multiplicere fortyndingsfaktoren for hvert trin til det sidste trin. Dette kan matematisk illustreres ved ligning D_t = D₁ x D₂ x D₃ x ... x D_n hvor D_t er den samlede fortyndingsfaktor og D_n er forholdet mellem fortynding.

Lad os sige, at du lavede en "1:10" fortynding af væsken fire gange. Forbind fortyndingsfaktoren til ligningen: D_t = 10 x 10 x 10 x 10 = 10.000.
Den endelige fortyndingsfaktor for det fjerde rør i den serielle fortynding er "1: 10000". Koncentrationen af stoffet er nu ti tusind gange mindre end den oprindelige ufortyndede opløsning.

Billede med titlen Serial Dilutions Trin 8

Bestem koncentrationens opløsning efter fortynding. For at bestemme den endelige koncentration af opløsningen efter den serielle fortynding vil det være nødvendigt at kende initialkoncentrationen. Ligningen er som følger: C_endelige = C_indledende / D hvor C_endelige er den endelige koncentration af den fortyndede opløsning, C_indledende er initialkoncentrationen af den oprindelige opløsning og D er den forudbestemte andel af fortyndingen.

For eksempel: Hvis en initialcelleløsning har en koncentration på 1.000.000 celler pr. Ml, og fortyndingsforholdet er 1000, hvad er den endelige koncentration af den fortyndede prøve?
Brug ligningen:
- C_endelige = C_indledende / D
- C_endelige = 1.000.000 / 1000
- C_endelige = 1000 celler pr. Ml

Billede med titlen Serial Dilutions Trin 9

Sørg for at alle enheder matcher. Ved beregning er det nødvendigt, at enhederne altid falder sammen i slutningen. Hvis du starter med celler pr. Ml, skal du prøve at slutte med celler pr. Ml. Hvis den indledende koncentration er dele pr. Million (ppm), skal den endelige koncentration også være ppm.