Hvordan man laver en kultur af væv

Vævskultur er en måde at få flere celler fra et givet væv ved at dyrke dem uden for kroppen. For at lave en, er det nødvendigt at skabe et kunstigt miljø, hvor cellerne vil vokse. Når de er blevet dyrket, kan de bruges i forskellige typer af undersøgelser, herunder vævsbiokemi og lægemiddeludvikling.

indhold

Trin

Del 1forbereder at vokse

Video: hvordan fuldspartler man med sandspartel

Del 2udførelse af kulturen

Video: spartling af ujævn væg - trin for trin
Video: spartling af gipsvæg. se hvordan du selv spartler gipsplader her
Kilder og citater

trin

Del 1
Forbereder at vokse

Bestem, hvad du vil vokse. Det er muligt at dyrke både plante- og dyreceller. Nogle gange er det ønskeligt at dyrke væv ekstraheret direkte fra en plante eller et dyr. I andre tilfælde dyrkes celler fra en tidligere dyrket og lagret cellelinie.

Nye kulturer kan skabes ud fra væv taget fra en organisme. Disse celler kaldes primærkulturen. De vil kun opdele, indtil de bliver senescens.
For at skabe en kontinuerlig cellelinje skal du ændre det med brug af kemikalier eller vira, så cellerne fortsætter med at opdele ubestemt tid.

Billede med titlen Gør et vævskultur Trin 2

Forbered kulturmiljøet. De nødvendige betingelser vil variere afhængigt af typen af celle, men generelt vil det være nødvendigt at tilvejebringe:

Temperaturstyret. Den ideelle temperatur varierer afhængigt af typen af celle, du har til hensigt at vokse, men vil sandsynligvis ligge mellem 20-45 ° C.
pH-kontrolleret. Den bedste pH vil være et sted mellem 6,0 og 7,5.
Kontrolleret osmotisk tryk
Tilstrækkelig udveksling af ilt og kuldioxid
hormoner
Vækstfaktorer
Substrat, der giver cellerne de nødvendige næringsstoffer, såsom aminosyrer, kulhydrater, vitaminer og mineraler.
Lys. Lys er afgørende, hvis du vil vokse planteceller, som udfører fotosyntese.

Billede med titlen Gør et vævskultur Trin 3

Bestem hvilken type substrat, der vil give. Mange celler vokser bedst, når de er fastgjort til et substrat. Typer omfatter:

Substrat faststof, også kaldet adherent. Tisser opnået fra organer som nyrerne er sædvanligvis vedhængende, fordi de er fikseret i bindevæv.
Halvfast eller monolagssubstrat. Denne type kultur danner ofte et lag af celler i bunden af beholderen.
Suspensionskultur. Celler af denne type behøver ikke at forankres til substratet. I stedet vokser de flydende. Blodceller dyrkes sædvanligvis i suspension.

Video: Hvordan fuldspartler man med sandspartel

Del 2
Udførelse af kulturen

Billede med titlen Gør et vævskultur Trin 4

Følg producentens protokoller for at starte afgrøden. Der er flere virksomheder, der leverer materialer og udstyr til at føre afgrøder til laboratorier. Når du erhverver materialet, modtager du også protokoller for at starte kulturen. De beskriver præcis, hvordan du skal overføre den prøve, du vil vokse til kulturmiljøet. Nogle kendte virksomheder omfatter:

Molekylær Brasilien
Qiagen
Fisher Scientific
Thermo Scientific

Billede med titlen Gør et vævskultur Trin 5

Foder cellerne, hvis de er pattedyr. Normalt bør dyrkningsmediet genopfyldes hver 2-3 dage. Følg producentens protokoller for at drive cellerne.

Denne proces skal tage 20 minutter eller mindre.
Cellerne vil dø, hvis du ikke giver den rigtige mængde næringsstoffer.

Video: Spartling af ujævn væg - trin for trin

Video: Spartling af gipsvæg. Se hvordan du selv spartler gipsplader her

Billedets titel Gør en vævskultur Trin 6

Opdel kulturer, når de begynder at blive overbelastede. For at holde kulturen voksende, kan det være nødvendigt at overføre nogle af cellerne til en ny disk med lavere densitet. Dette vil tillade både den oprindelige kultur og den nye kultur at fortsætte med at vokse.

Det er også muligt at fryse nogle af afgrøderne til fremtidigt arbejde eller gentage forsøg, hvis der forekommer kontaminering. Følg de beskrevne protokoller for at bestemme kryopreserveringen eller frysningstemperaturerne for kulturerne.