Sådan måles bakteriel befolkningstilvækst

Der er flere måder at måle befolkningens vækst på bakterier, hvoraf nogle er mere komplekse end andre. Mens man ofrer en smule konsistens i målinger, er de enkleste metoder nøjagtige nok og bruges ofte. De mest kendte er bakterieobservation og tælling, våd og tør massemåling og turbiditetsmåling. Din skoles laboratorium skal have det udstyr og de ting, der er nødvendige for at gøre mindst et af disse eksperimenter.

indhold

Trin

Metode 1observation af bakterierne direkte
Metode 2måling af de fugtige og tørre masser
Metode 3måling turbiditet

Advarsler
Materialer krævet
Kilder og citater

trin

Metode 1
Observation af bakterierne direkte

Pick up materialerne. Der er nogle specielle værktøjer, du bør have udover hvad der er til stede i de fleste laboratorier. At have de nødvendige instrumenter og containere i hånden letter udførelsen og eliminerer behovet for at gå frem og tilbage i kabinettet. Det er vigtigt at vide, hvad hvert element vil blive brugt fra begyndelsen. Derudover er det værd at vide nogle grundlæggende vilkår.

Tag et hæmocytometer, også kaldet "Neubauer-kammeret". Disse værktøjer leveres med et kamera, blade, og i nogle tilfælde endda loupes for bedre visning, og det er nemt at lade dem være klar til brug. Du kan købe dem i forsyningsforretninger til skoler og laboratorier, og de vil komme med instruktioner, som vil guide dig igennem processen.
Tag to petriskåle og et Drigalski-håndtag til henholdsvis overflade- og dybdespredningsmetoderne. Disse er beholderne, hvor bakterierne vil blive observeret.
"Kultur" er det udtryk, der bruges til at beskrive den kunstige befolkningsvækst af en organisme i videnskabelige forsøg.
Kulturmediet eller bouillon er det miljø, hvor bakterier former sig.

Billede med titlen Mål Bakteriel Vækst Trin 2

Brug petriskålen med den ønskede metode. Du kan sætte bakterierne direkte på det for at observere dem med mikroskopet. Herefter skal du se, hvor mange bakterielle celler der er.

Billede med titlen Measure Bacterial Growth Trin 3

Brug de korrekte koncentrationer. Hvis der er for mange bakterier, overlapper hinanden hinanden og kan ikke tælles korrekt. Fortynd kulturen ved at blande den med mere af bouillon. Hvis de er for få, har du ikke nok til et præcist nummer. Filtrer bouillon med et egnet filtreringssystem.

Billede med titlen Measure Bacterial Growth Trin 4

Tæl bakterierne. Det sidste skridt er at gøre en fysisk tælling af bakterierne. Se på hæmocytometeret gennem forstørrelsesglasset og skriv ned det beløb, du kan tælle. Sammenlign denne værdi med andre tests.

Metode 2
Måling af de fugtige og tørre masser

Billede med titlen Mål Bakteriel Vækst Trin 5

Har det rigtige udstyr i hånden. Dette indebærer brugen af dyrt udstyr og tager meget tid. Medmindre laboratoriet er udstyret med de rigtige genstande, skal du prøve en anden metode. Men hvis det er muligt, måler man den fugtige og tørre masse, som giver dig mere konsekvente aflæsninger. Du skal bruge:

Hydraulisk Gravity Konvektionsvarmer-
Plader til vejning i aluminium-
Sæt med flasker-
Centrifuge- eller laboratoriefiltreringssystem.

Billede med titlen Measure Bacterial Growth Trin 6

Kulturen skal være i en Erlenmeyer-kolbe. Ellers sættes det i en. På dette tidspunkt skal det være i bouillon, selvom det bliver adskilt i fremtiden.

Billede med titlen Measure Bacterial Growth Trin 7

Tør en aluminiumsvæg i laboratorieovnen. Et alternativ er at anvende en acetatfiltermembran med 47 mm diameter og 0,45 μm porer. Uanset hvad du foretrækker, veje nu for at vide, hvor meget der skal trækkes fra målingerne, når bakterier er til stede.

Billede med titlen Mål Bakteriel Vækst Trin 8

Bland hætteglasset, hvori kulturen blev indsat og lad det være homogent. Bakterier vil naturligvis synke på grund af tyngdekraften. Ryst forsigtigt, så de fordeles homogent i flasken. På den måde får du en mere repræsentativ prøve.

Billede med titlen Mål Bakteriel Vækst Trin 9

Brug en centrifuge til at adskille bakterierne fra bouillon. Dette værktøj centrifugerer hætteglasset og en modvægt ved høj hastighed, dræner bouillon og forlader kulturen. Læs denne artikel for en mere præcis beskrivelse af processen.

Billede med titlen Mål Bakteriel Vækst Trin 10

Skraber wienerbrødene og læg den på vejepladen. Kassér bouillon. Du har ikke længere brug for det, men flasken bliver nødvendig, så gem den til senere.

Billede med titlen Mål Bakteriel Vækst Trin 11

Skyl centrifugen og hæld vaskevandet ind i vejen. Tilsæt kolben med vaskevand til bakterierne, hvilket vil give dig den våde vægt.

Billede med titlen Measure Bacterial Growth Trin 12

Beregn tørvægt. Til denne måling placeres vægten i ovnen ved 100 ° C i seks til 24 timer og følg de specifikke anvisninger for hvert udstyr. Pas på ikke at hæve temperaturen til det punkt, hvor du brænder bakterierne. Så indvej og husk at trække vægten af vejepladen.

Metode 3
Måling turbiditet

Billede med titlen Mål Bakteriel Vækst Trin 13

Tag det nødvendige udstyr. Du skal bruge en lyskilde og et spektrofotometer. Disse varer er tilgængelige hos laboratorieforretninger. Spektrofotometret giver instruktioner til korrekt brug af den overtagne model. Dette er et relativt billigt og nemt at bruge udstyr, en af de mest almindelige metoder til måling af bakteriel befolkningstilvækst.

Billede med titlen Mål Bakteriel Vækst Trin 14

Lysere prøven. I en nøddeskal er turbiditeten relateret til prøveens opacitet. Du skal få en læsning af denne variabel, som måles i NTU (nephelometriske turbiditetsenheder). Udstyret skal kalibreres, før den nøjagtige turbiditet af prøven tages.

Billede med titlen Mål Bakteriel Vækst Trin 15

Tag noter. Uklarheden svarer til mængden af bakterier, der er til stede i prøven. Spektrofotometeret fortæller stadig, hvad procentdelen af transmissionsværdien (% T) er. Dette tal vil være højere, da uklarheden er lavere. Sammenlign forskellige testresultater for at måle bakteriepopulationens vækst.

advarsler

Fordi du har at gøre med bakteriekolonier, er det vigtigt at tage de nødvendige forholdsregler, som f.eks. Brug af sikkerhedsbriller og handsker. Du kan også bruge en maske, især hvis du ikke kender den type bakterier du arbejder med.
Tag forholdsregler med enhver form for bakterier, selv dem, som du anser for ufarlige, og sørg for, at eventuelle udskæringer, udskæringer eller skraber er helt dækket, inden du begynder.